在微生物實驗中，厭氧箱是維持嚴格無氧環境（通常氧濃度≤10ppm）的核心設備，而培養皿的取放操作是保障厭氧環境穩定的關鍵環節。外界氧氣的微小侵入都可能導致厭氧微生物活性降低、培養失敗，甚至影響整個實驗數據的可靠性。因此，遵循科學的操作順序與防護技巧，是實現無氧環境精準守護的核心前提。

　　操作前的環境與設備狀態確認，是避免氧氣侵入的第一道防線。首先需通過厭氧箱的氧濃度監測儀，確認箱內氧濃度已穩定在實驗要求范圍內，若濃度超標需啟動氮氣吹掃或催化劑再生功能，待數據達標后再進行操作。同時檢查厭氧箱的過渡艙密封性，關閉過渡艙外門后觀察壓力變化，確保無漏氣現象——過渡艙是內外環境的緩沖屏障，其密封性直接決定取放過程中氧氣的侵入風險。此外，操作人員需穿戴無菌手套，避免手部污染物帶入箱內，同時提前將培養皿或待轉移物品在超凈工作臺滅菌備用，減少后續操作耗時。

　　嚴格遵循“過渡艙預處理—箱內操作—過渡艙后處理”的三段式操作順序，是隔絕氧氣的核心保障。第一步為過渡艙預處理：將待放入的培養皿放入過渡艙內，關閉外門后啟動抽真空程序，通常抽至-0.08MPa后保持30秒，再通入氮氣至常壓，重復2-3次“抽真空—充氮氣”循環，利用氮氣置換出過渡艙內的殘留氧氣。對于從箱內取出的培養皿，需先放入過渡艙并關閉內門，同樣執行2次置換循環，避免開箱時箱內無氧環境與外界空氣直接連通。

　　箱內取放的精細化操作，是避免局部氧氣聚集的關鍵。打開過渡艙內門時動作需緩慢輕柔，避免因氣流沖擊導致箱內氣體紊亂，取放培養皿時應依托箱內無菌操作平臺，減少手臂在箱內的活動幅度與停留時間。取放順序需遵循“先里后外、先重后輕”原則：先取靠箱內深處的培養皿，再取外側的；較重的培養皿先放置穩固，再擺放輕質的，防止傾倒導致操作中斷。同時培養皿應避免堆疊過高，確保箱內厭氧氣體可充分環繞，減少因遮擋形成的局部微氧環境。
 

　　操作過程中的細節把控，能進一步降低氧氣侵入風險。取放培養皿時，手指應握持培養皿邊緣，避免觸碰皿蓋與皿底的貼合處，防止密封不嚴導致箱內氣體泄漏。若需在箱內進行培養皿開蓋操作，需將培養皿置于無菌操作區中央，開蓋動作迅速且保持皿蓋內側朝下，減少與空氣的接觸面積。完成取放后，需及時清理箱內操作平臺的雜物，關閉過渡艙內門并再次確認箱內氧濃度，確保無異常波動。

　　特殊場景的氧氣防護需強化操作規范。對于含有嚴格厭氧微生物的培養皿，取放前可在過渡艙內放置厭氧指示劑，通過顏色變化直觀驗證艙內無氧狀態。若實驗過程中需頻繁取放培養皿，應控制每次操作間隔不低于5分鐘，給箱內環境足夠的緩沖時間，避免連續操作導致的氧濃度累積升高。此外，長期使用的厭氧箱需定期檢查手套密封性與氣體管路通暢性，手套出現老化破損時需立即更換，防止操作時氧氣通過手套縫隙滲入。

　　厭氧箱內取放培養皿的操作，本質是“流程規范化、動作精細化、狀態可視化”的綜合管控。從過渡艙的氣體置換到箱內的輕柔操作，每一個步驟都圍繞“隔絕氧氣”核心目標展開。只有將規范操作內化為實驗習慣，才能確保厭氧環境的穩定可靠，讓厭氧微生物培養實驗獲得精準、可重復的結果，為微生物研究與應用提供堅實保障。